Molekulaarne diagnoos vastab molekulaarsete tehnikate komplektile, mille eesmärk on tuvastada DNA muutused, mis võivad viidata näiteks geneetilistele haigustele või vähile. Lisaks sellele kasutatakse nakkushaiguste tuvastamiseks ja kinnitamiseks laialdaselt molekulaarseid meetodeid, kuna need kujutavad endast kiiremat ja täpsemat diagnostilist meetodit.
Molekulaarne diagnoos on kallis ja arstid seda ei soovita sageli, kuid see annab täpsed tulemused muutuse olemasolu kohta, kuidas see võib häirida organismi toimimist ja patsiendi reaktsiooni haigusele. ravi.
Mis see on?
Molekulaarset diagnoosimist saab läbi viia mitmel eesmärgil, peamiselt:
- Leukeemiaga seotud mutatsioonide tuvastamine, näiteks kroonilise müeloidse leukeemia (KML) iseloomulik BCR-ABL translokatsiooni tuvastamine;
- Näiteks hematoloogiliste haiguste, näiteks päriliku hemokromatoosi, polütsüteemia vera, olulise trombotsüteemia ja trombophiliaga seotud mutatsioonid - mõista, mis on trombofiilia ja kuidas ravimine toimub;
- Molekulaarsed muutused, mis näitavad näiteks vähktõve esinemist, näiteks kolorektaal-, kopsu-, rinna- ja ajuvähki;
- Lisaks HPV viiruse tuvastamisele on nakkushaiguste, nagu hepatiit, uretriit, toksoplasmoos, leishmaniaos jne, diagnoosimine.
Molekulaarne diagnoos on hoolimata teiste diagnoosimeetoditega võrreldes kallis, kuid see on täpsem, kuna see suudab teatada teatud haiguse muutumisest ja selle muutuse määrast organismis, aidates sellega kaasa inimese ravile.
Lisaks erinevate haiguste diagnoosimiseks kasutatakse ka molekulaarseid meetodeid, et hinnata vastust ravile, eriti vähiga inimestel, mis on üks kõige tõhusamaid meetodeid, mis näitavad haiguse arengut ja taastumist.
Kuidas see on tehtud
Molekulaarset diagnoosimist saab teha ühegi proovi abil ja arstil palutakse esitada teave patsiendi seisundi kohta, mis võib olla uriin, sülg või enamus ajast veri. Uuringut ei ole vaja kiirendada ega mõnda muud ettevalmistust.
Proov kogutakse ja saadetakse laboratooriumisse koos arsti nõuannetega, mis näitavad eksami või teadustöö tüüpi, mida tuleks teha. Rakendatav molekulaarne meetod sõltub soovitud eksamist ja hõlmab mitmeid täpseid protseduure, mille lõppeesmärk on tuvastada arsti soovitud muutuste olemasolu või puudumine.
Tavaliselt kasutatakse ainult väikest kogust proovi, ülejäänu salvestatakse nii, et vajaduse korral katse korratakse.
Vaadake, millised on peamised molekulaarsed tehnikad
PCR
PCR, mis on lühike polümeraasi ahelreaktsiooniks, on molekulaarne tehnik, mis koosneb geneetilise materjali fragmendi amplifitseerimisest, olgu selleks DNA või RNA, eesmärgiga tuvastada mutatsioone ja seeläbi aidata haiguste diagnoosimisel.
See meetod on valmistatud geneetilise materjali ekstraheerimisest ja puhastamisest, mis seejärel viiakse segule, milles üks komponentidest on restriktsiooniensüüm, mis varieerub vastavalt soovitud eksamile ja mille ülesanne on lõigata materjal fragmentidesse võimalikke geneetilisi muutusi tuvastada. Segu pannakse termotsüklerisse, mis on seade, mis toimib läbi eksperdi näidatud temperatuuri muutuse vastavalt eksamile ja sellisel viisil võimaldab geenifragmendi amplifitseerimist. Tavalise PCR korral amplifitseeritakse PCR-saadus elektroforeesi, mis on molekulaarne meetod, mis põhineb fragmentide massil ja suurusel, st nende omaduste põhjal genereeritakse ribade muster, mille analüüs on tehtud mis põhineb positiivse kontrolli bändil, st bändil, mis teadaolevalt vastab geneetilisele muutusele.
Reaalajaline PCR, mida nimetatakse ka qPCR-ks, on kvantitatiivse PCR-i tüüp, see tähendab lisaks geneetilise muutuse tuvastamisele ka geeniekspressiooni, st kui palju muutuvat geeni ekspresseeritakse organismis, ja seda saab seega kasutada diagnoosi andmiseks ja ravi jälgimiseks. Reaalajaline PCR ei vaja elektroforeesi, kogu geneetilise materjali võimendamise ja analüüsi protsess toimub aparatuuri abil ja tulemust tõlgendab koolitatud tervishoiutöötaja.
Järjestamine
Järjestamine on molekulaarne meetod, mis hõlmab DNA nukleotiidjärjestuse määramist. PCR-i sarnase reaktsiooniga toimub järjestamine, kuid amplifikatsioonisegis lisatakse fluorokroomide lisamisega modifitseeritud nukleotiide, mis amplifitseeritakse, modifitseeritud nukleotiidid inkorporeeritakse DNA-sse ja genereeritakse mitu fragmenti, mis vastavad järjestuse produktile.
Reaktsiooniprodukt asetatakse seadmesse, mida nimetatakse DNA järjestusrikaks, kusjuures kui aparatuuri laser lööb fragmendid, siis põlevad fluorokroomid, kiirgavad fluorestsentsi, mida aparaat näitab piikide, iga vastava piigi nukleotiidile. Reaktsiooni lõpus informeerib seade DNA järjestust, aidates arstil geneetiliste haiguste diagnoosimisel.
