Elektroforees on laboritehnika, mille eesmärk on eraldada molekulid vastavalt nende suurusele ja elektrilaengule, et oleks võimalik diagnoosida haigusi, kontrollida valgu ekspressiooni või tuvastada mikroorganisme.
Elektroforees on lihtne ja odav protseduur, mida kasutatakse laboriprotseduurides ja uurimisprojektides. Elektroforeesi eesmärgi kohaselt võib näiteks diagnoosi saamiseks olla vajalik teha muid katseid ja eksameid.
Milleks see on mõeldud
Elektroforeesi saab läbi viia mitmel eesmärgil, nii uurimisprojektides kui ka diagnoosimisel, kuna see on lihtne ja odav tehnika. Seega saab elektroforeesi teha:
- Tuvastage viirused, seened, bakterid ja parasiidid, kusjuures seda rakendust kasutatakse sagedamini uurimisprojektides;
- Isaduse katse;
- Kontrollige valkude ekspressiooni;
- Tuvastage mutatsioonid, mis on kasulikud näiteks leukeemiate diagnoosimisel;
- Analüüsige ringleva hemoglobiini tüüpe, olles kasulik sirprakulise aneemia diagnoosimisel;
- Hinnake veres leiduvate valkude hulka.
Elektroforeesi eesmärgi kohaselt võib diagnoosi lõpuleviimiseks olla vajalik arsti jaoks muude täiendavate testide läbiviimine.
Kuidas seda tehakse
Elektroforeesi tegemiseks on vajalik lisaks UV- või LED-valgusseadmele, tuntud ka kui transilluminaator, geel, mis võib olla polüakrüülamiid või agaroos, sõltuvalt objektiivist, elektroforeesi puhver ja vaat, molekulmassimarker ja fluorestsentsvärv.
Pärast geeli ettevalmistamist tuleb geelis olevate süvendite, rahvapäraselt kammide, valmistamiseks panna konkreetne ese ja lasta geelil taheneda. Kui geel on valmis, kandke ained lihtsalt aukudesse. Selleks tuleb ühte süvendisse panna molekulmassimarker, positiivne kontroll, mis on aine, mis on teada, negatiivne kontroll, mis tagab reaktsiooni kehtivuse, ja analüüsitavad proovid. Kõik proovid tuleb segada fluorestseeruva värvainega, sest nii on võimalik transillinaatoril olevaid ribasid visualiseerida.
Proovidega geel tuleb asetada elektroforeesivaati, mis sisaldab spetsiifilist puhverlahust, ja seejärel lülitada seade sisse nii, et tekiks elektrivool ja sellest tulenevalt potentsiaalne erinevus, mis on oluline osakeste eraldamiseks vastavalt nende koormusele ja suurusele. Elektroforeetiline tööaeg varieerub vastavalt protseduuri eesmärgile ja võib kesta kuni 1 tund.
Pärast kindlaksmääratud aja möödumist on võimalik vaadata elektroforeesi läbimist läbi transilluminaatori. Kui geel asetatakse UV- või LED-valguse alla, on võimalik visualiseerida ribamustrit: mida suurem on molekul, seda vähem see migreerub, lähenedes kaevule, samas kui molekul on kergem, seda suurem on rändepotentsiaal.
Reaktsiooni kinnitamiseks on vaja positiivse kontrolli ribasid visualiseerida ja negatiivses kontrollis mitte midagi visualiseerida, vastasel juhul näitab see saastumist ja kogu protsessi tuleb korrata.
Elektroforeesi tüübid
Elektroforeesi saab läbi viia erinevatel eesmärkidel ja vastavalt selle otstarbele võib kasutada mitut tüüpi geeli, kõige tavalisemad on polüakrüülamiid ja agaroos.
Elektroforeesi mikroorganismide tuvastamiseks tehakse sagedamini uurimislaborites, kuid diagnostilistel eesmärkidel saab elektroforeesi kasutada hematoloogiliste haiguste ja valkude hulga suurenemisega arenevate haiguste tuvastamiseks, mis on peamised elektroforeesi tüübid:
1. Hemoglobiini elektroforees
Hemoglobiini elektroforees on laboris tehnika, mis viiakse läbi veres ringlevate erinevat tüüpi hemoglobiini tuvastamiseks, mis võimaldab tuvastada hemoglobiini sünteesiga seotud haigusi. Hemoglobiini tüüp tuvastatakse elektroforeesi abil spetsiifilises pH-s, ideaaljuhul vahemikus 8,0–9,0, kusjuures kontrollitakse ribade mustrit, mida saab võrrelda normaalse mustriga, võimaldades tuvastada ebanormaalsete hemoglobiinide olemasolu.
Milleks seda tehakse: Hemoglobiini elektroforeesi tehakse hemoglobiini sünteesiga seotud haiguste, näiteks sirprakulise aneemia ja hemoglobiin C haiguse uurimiseks ja diagnoosimiseks, lisaks sellele, et see on kasulik ka talasseemia eristamisel. Siit saate teada, kuidas tõlgendada hemoglobiini elektroforeesi.
2. Valkude elektroforees
Valgu elektroforees on uuring, mida arst soovib veres ringlevate valkude hulga hindamiseks ja seeläbi haiguste tuvastamiseks. See test tehakse vereproovist, mis tsentrifuugitakse plasma saamiseks - see vere osa, mis koosneb muude ainete hulgas valkudest.
Pärast elektroforeesi saab visualiseerida ribade mustri ja seejärel graafiku, milles on näidatud iga valgufraktsiooni kogus, mis on diagnoosi jaoks põhiline.
Milleks seda tehakse: Valkude elektroforees võimaldab arstil uurida hulgimüeloomi, dehüdratsiooni, tsirroosi, põletiku, maksahaiguse, pankreatiidi, luupuse ja hüpertensiooni esinemist vastavalt bändimustrile ja uuringuaruandes esitatud graafikule.
Saage aru, kuidas seda tehakse ja kuidas mõista valgu elektroforeesi tulemust.
Kas see informatsioon oli kasulik?
jah ei
Teie arvamus on oluline! Kirjutage siia, kuidas saaksime oma teksti paremaks muuta:
Kas küsimusi on? Vastamiseks klõpsake siin.
E-post, millele soovite vastust saada:
Kontrollige meile saadetud kinnitusmeili.
Sinu nimi:
Külastuse põhjus:
--- Valige oma põhjus --- HaigusElake pareminiAitage teist inimestHankige teadmisi
Kas olete tervishoiutöötaja?
EiArst, farmaatsiaõde, toitumisspetsialist, biomeditsiiniline, füsioterapeut, kosmeetik, muu
Bibliograafia
- ENTSÜKLOPEEDIA BIOSFÄÄR, TEADES TEADUSKESKUST. Elektroforees: mõisted ja rakendused. 2015. Saadaval aadressil :. Juurdepääs 24. septembril 2019
- KASVI. Mis on elektroforees ja miks see on oluline?. Saadaval: . Juurdepääs 24. septembril 2019
